尊龙凯时推出了一款基于探针法荧光定量PCR原理的检测试剂盒，具有多项显著特点。

产品特点

本产品的主要特点包括：

1. 即开即用：用户只需提供样品DNA模板，无需复杂准备。
2. 优化的引物和组分，确保高灵敏度，适合多种应用。
3. 配备阳性对照，帮助区分假阴性样本。
4. 特异性高：引物设计基于中间普雷沃菌DNA序列的高度保守区域，避免与其他生物样本DNA发生交叉反应。
5. 适用于定性和定量检测，在定量检测时，线性范围可达五个数量级。
6. 可进行50次20μL体系的探针法荧光定量PCR反应。
7. 本产品仅限于科研用途。

使用方法

使用前的准备工作包括：

一、DNA提取

采用合适的方法从样本中提取和纯化DNA，确保与市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。

二、稀释标准曲线样品

为确保标准操作流程，稀释阳性对照，避免污染其他样品或试剂盒成分。请务必在独立区域进行稀释操作。可以参照如下步骤进行：

1. 标记6个离心管，编号为7至2。
2. 使用带芯枪头分别向每个管中加入45μL DEPC-H₂O。
3. 在7号管中加入5μL 1×10⁸拷贝/μL的阳性对照，震荡1分钟以获得1×10⁷拷贝/μL的标准曲线样品，随后放置于冰上备用。
4. 依次在6号管和5号管中采用相同方法稀释，直至得到6个稀释度的标准曲线样品。
5. 若不需要制作标准曲线，仅需将阳性对照稀释至1×10⁵拷贝/μL即可。

三、试剂配制

根据待检测样品数量N，准备N+2个qPCR管，包括阴性对照以及阳性对照，向各PCR管中分别加入预定成分，详细信息请参见产品说明书。

四、添加模板

向各qPCR管中添加2μL的模板，按顺序为阴性对照（DEPC-H₂O）、待测样品模板及婴儿利什曼虫qPCR阳性对照。离心30秒后，立即进行扩增反应。

五、扩增反应

将PCR管放置在PCR扩增仪器的样品槽中，按照程序进行扩增，详细操作请参阅说明书。

六、结果分析

若制作标准曲线，需将阳性对照浓度的log值作为横轴，Ct值作为纵轴绘制标准曲线。通过待测样品的Ct值推算样品DNA浓度。如果未制作标准曲线，按以下标准判定结果：

1. 阳性对照结果：Ct值<30，呈现明显指数增长，曲线应为典型S型。
2. 阴性对照结果：Ct值38或无Ct值，无明显增长期。
3. 样本检测结果：Ct值<35，indicative of the presence of the infant Leishmania; Ct值38或无Ct值，表明样本中未检测到此病原；Ct值在35-38之间需复检，如复检结果仍在此范围内且呈现指数增长，则判定为阳性，否则为阴性。

运输及保存

本产品应低温运输，存储于-20℃，保存期限为一年。阳性对照需单独放置，以避免污染其他试剂。

尊龙凯时，致力于为客户提供高质量的生物医疗产品，确保科研工作的可重复性和可靠性。