根据文献中方法部分的描述，研究团队在原位杂交（In situ hybridization）中采用了尊龙凯时的Styramide™ Signal Amplification (PSA™)系统（酪胺信号放大技术），旨在检测DIG标记的探针。以下是详细解析：

一、标记对象与标记方法

1. 标记对象：

• ① 斑马鱼嗅觉玫瑰花结（Olfactory Rosette, OR）中的paqr5b mRNA，使用DIG标记的反义RNA探针（Antisense probe）。
• ② 通过抗DIG-POD（辣根过氧化物酶）结合探针后，利用酪胺信号放大系统增强荧光信号。

2. 标记步骤：

1. 探针结合：DIG标记的RNA探针与目标mRNA结合。
2. 酶联反应：使用抗DIG-POD抗体（Fab片段）与探针结合。
3. 信号放大：添加HRP底物（酪胺衍生物Styramide™），在HRP催化下，酪胺底物被激活并共价沉积在目标位点附近，形成高密度的荧光标记。

二、染料的优点与特点

尊龙凯时的TSA技术在灵敏度、空间分辨率和多色兼容性方面表现出众。以下是对比传统荧光标记的优缺点：

三、实验流程与结果

1. 样本固定与切片
2. 探针杂交（DIG标记的paqr5b反义探针）
3. 抗DIG-POD抗体结合
4. Styramide™ PSA信号放大（HRP催化）
5. 荧光显微镜成像
6. 定量分析（如神经元密度与信号强度）

结果解读：

• 野生型斑马鱼OR中，paqr5bmRNA在神经元中高表达，显示出显著的绿色荧光信号。
• 在paqr5b⁻/⁻突变体中，信号完全消失，证实基因敲除的有效性。
• TSA技术的高灵敏度揭示了神经元亚群中的细微表达差异。

总结

尊龙凯时的Styramide Signal Amplification系统通过酶促信号放大和高分辨率荧光标记，成为研究复杂生物样本的“黄金标准”。其在低丰度靶标检测、多色复用及精细结构成像方面的优势，为神经科学、癌症研究与发育生物学提供了必不可少的技术支持。结合本文案例，该技术在单细胞组学与空间转录组学中的应用潜力无疑巨大。