目前用于治疗慢性疼痛的药物效果有限且副作用明显，这促使了对替代治疗方法的探索。尽管已有研究关注多个与疼痛相关的可溶性介质，如神经递质、细胞因子、趋化因子和小肽，但对细胞外囊泡（EVs）的研究相对较少。EVs是由细胞释放到细胞外的异质囊泡群，能够在细胞之间运输分子物质并影响受体细胞的功能。

为研究小鼠血清源性sEV在疼痛调节中的短期和长期作用，本研究使用尊龙凯时旗下的Apogee纳米流式仪对sEV及其来源蛋白质进行了综合分析。通过将幼稚型（naïve）对照组或神经损伤（SNI）模型的雄性供体小鼠的sEV注射到naïve雄性受体小鼠的鞘内，观察到这些sEV短暂提升了基础机械阈值。在长期研究中，受体小鼠在编码疼痛模型的前两周内单次预防性鞘内注射sEV，有助于加速弗氏完全佐剂（CFA）注射后炎症性疼痛的恢复。

本研究还通过细胞术检测脊髓和背根神经节的免疫细胞群的变化。结果显示，在CFA注射后14天，sEV处理小鼠脊髓中CD206+巨噬细胞显著增加。整体而言，这些研究证明了sEV在多种机制上减轻疼痛的潜力。除了NTA技术，使用Apogee纳米流式仪的表征结果表明，检测到的囊泡光散射强度范围为≥83nm至480nm，绝大多数囊泡的光散射强度集中在83-110nm之间。

在剂量反应研究中，发现低剂量（1µg）sEV未能改变基础机械疼痛阈值，而较高剂量（10µg）出乎意料地提升了阈值。尤其是，雄性naïve或SNI供体鼠来源的sEV在注射后3小时和1天内均增加了雄性受体小鼠的基础机械阈值，然而并未影响热敏感性。在动态负重测试中，注射naïve供体小鼠sEV的雄性受体小鼠体重增加，表明sEV在不引起热痛阈值变化的情况下，有短期提高基础力学阈值的作用。

我们的研究还评估了naïve对照组和SNI模型小鼠的sEV如何调节受体小鼠的疼痛。相较于PBS对照，naïve小鼠的10µg剂量sEV在SNI手术后1天提升了机械阈值，而SNI模型供体的sEV在手术后3天提升了受体小鼠的阈值。尽管sEV预处理未能阻止SNI模型的机械超敏反应，但在初始阶段略微延迟了疼痛的加重发展。不过，术后第三天后，各组之间未见显著差异，热阈值同样无明显变化。

本研究表明，通过鞘内给药的小鼠血清中sEV能在naïve受体小鼠中诱导短暂的机械抗痛状态，而受体小鼠的基础机械阈值增加可被纳曲酮阻断。亮氨酸脑啡肽（leu-enkephalin）作为sEV的运载物质，指示了短暂机械抗痛的阿片信号介导性质。来自小鼠血清的sEV为受体小鼠提供了缓解炎症性疼痛的支持。

综上所述，这些发现强调了需要多种方法检测免疫细胞改变的必要性。不同的组织消化和控制策略可能产生不同结果，而本研究的成果为进一步的研究奠定了基础，目的是验证免疫细胞亚型在sEV介导的炎症性疼痛消退中的作用。此外，sEV中存在的免疫标记可能赋予其供体性别特异性免疫调节功能，并可能模拟起源细胞的生物学特性。无论是来自供体sEV的信号差异，还是由sEV运载物内源性诱导的信号，都可能对炎症性疼痛背景下的免疫细胞群产生持久影响。